Использование нанотехнологии в аквариумистике, при инфекционной патологии рыб

В связи с тем, что многие виды микроорганизмов являются облигатными представителями организма животных и человека, водоемов, почв, грунтов, ила, растений воды и суши, нами была разработана технология новой биологической модели Акваихтиопата (декоративные рыбки) для тестирования некоторых видов микроорганизмов вызывающих инфекционные болезни животных и человека. Для этого был выбран вид аквариумных рыбок данио рерио, краткая характеристика которых приводится ниже:
Подотряд - cyprinoidei. Семейство - Cyprinidae.
Род - Brachydanyo.
Вид Brachydanio rerio (H.-B, 1882).

Данио рерио, Д. зебра. Ареал: восток Индии, Бангладеш. Длиной до 6см, обычно 4,5. Окрашены в желтоватый цвет с продольными параллельно идущими синими полосами. Самец обычно стройнее и мельче самки, на анальном плавнике у него на 1-2 полосы больше. Половозрелы в 3.5-6 мес.

Условия содержания: Т= (15) 18-24; состав воды особого значения не имеет, но вода должна быть свежая; pH=(6.0)6.5-7.0(7.2).

Данный вид был выбран по причине того, что он является одним из наиболее распространенных у аквариумистов, как начинающих, так и более опытных, а также своей устойчивости к экстремальным условиям окружающей среды.

Нами были поставлены следующие задачи:
1. Отработать пероральный способ заражения рыб.
2. Выявить и описать клиническую картину заболевания.
3. Разработать схему лечения рыб при каждом конкретном экспериментальном варианте.

В эксперименте участвовали четыре группы рыбок, три из которых служили опытными и одна контрольной. В каждой группе находилось по 50 голов. Рыбки помещались в пяти литровую стеклянную посуду с водой, которая состояла из 50% дистиллированной и 50% отстоянной водопроводной. рН воды была доведена до 7,0 и dH 12.

1-й опытной группе в акваторию вносили Е. сoli из расчета 0,5 млрд. м.т./мл.
2-й опытной группе в акваторию вносили Р. аeruginosa из расчета 0,5 млрд. м.т./мл.
3-й опытной группе в акваторию вносили S. intermedius из расчета 0,5 млрд. м.т./мл.
4-я группа служила контролем.

Для нормального развития микроорганизмов и возникновения заболевания, емкости помещали в термальную комнату с температурой 30 С. В дальнейшем, за рыбами велись наблюдения, с целью выявления клинической картины болезни и назначения дальнейшего лечения. В период проведения экспериментов всех рыб кормили хлопьевидным кормом ФЛЭК, производимым ООО Зоомир , Санкт-Петербург.

В 1-ой группе, где рыбки подвергались заражению Е.соli первые клинические признаки у 3-х рыбок проявились через 18 часов. Рыбки были вялыми и плавали на боку, из анального отверстия выделялась слизеподобная масса. Через 1,5 2 часа после проявления клинических признаков они пали. В дальнейшем, через 36 часов заболели остальные рыбы. Ограничиваясь этим, мы приступили к проведению лечебных мероприятий.

Все рыбки были пересажены в посуду аналогичного объема, и им был назначен следующий курс лечения:
- окситетрациклин 0,1г/100мл;
- норсульфазол 0,5г/100мл;
- фурациллин 0,1г/100мл;
- УДПЖ-α (железо в нанодисперсной форме) 0,0001г/л.

Антибиотикочувствительность проводилась с использованием дисков при посеве культуры на плотную питательную среду. Приготовленную из порошков сухую смесь растворяли в небольшом объеме воды и затем добавляли в емкость, где в течение 3 часов находились больные рыбы. Через сутки вода полностью менялась на новую, и процедуру повторяли вновь. Лечение проводилось 12 дней. В этот период произошел отход заболевших 9-и рыбок. У оставшихся 18-и рыбок в результате проведенного лечения клинические признаки болезни пропали и в течение последующих 14-и дней наблюдений не проявлялись. Таким образом, проведенный курс комплексной терапии, состоящий из антибиотиков, сульфаниламидных препаратов, нитрофуранов и УДПЖ-a обладает 60%-ым положительным эффектом при экспериментальном эшерихиозе аквариумных рыбок Данио рерио.

Во 2-й группе, где рыбок заражали P.aeruginosa, клинические признаки болезни отмечали через 4 дня. Из 30-и заболело 8 рыб. При этом клиническая картина была следующей: рыбы слабо реагировали на внешние раздражители, хаотично плавали у поверхности воды, не заглатывая воздух, у некоторых наблюдали симметричное и асимметричное пучеглазие. Через 1 день (5 дней от начала заражения) заболело еще 20 рыбок. У павших рыбок было слегка увеличено брюшко, и отмечались точечные кровоизлияния. Заболевшим рыбам было назначено следующее лечение:
- гликоциклин 0,5г/л;
- энрофлоксацин 2,0мл/л;
- левомицетин 0,1г/л;
- дибиомицин 1,0г/л;
- УДПЖ-α 0,0001г/л.

Процедуры проводились ежедневно, в течение 14 дней, вода постоянно сменялась, и в нее 2 раза в день добавлялась вышеуказанная смесь (экспозиция составляла 3 часа). В период лечения пало две рыбки. Эффективность мероприятий составила около 70%.

У рыбок 3-й группы, которых заражали S.intermedius, клиническое проявление болезни отмечали через 2-е суток. При этом было поражено более 20% рыб. Клиническое проявление болезни выражалось поражением жабр и передней трети части тела. При этом три рыбки пали. Было назначено лечение:
- олеморфоциклин 0,1г/л;
- мономицин 0,1г/л;
- УДПЖ-α 0,0001г/л.

Препараты вводили 2 раза в день, с экспозицией 3 часа и интервалом 12 часов, 5 дней подряд. При этом эффективность мероприятий составила около 70%.

Выводы:

1. Аквариумных рыбок вида Данио рерио можно использовать как биологический тест для экспериментального воспроизводства инфекции, микроорганизмами вида: E.coli, P.aeruginosa, S.intermedius.

2. Разработанные лечебные мероприятия при перечисленных инфекциях можно рекомендовать для других видов рыб подотряда cyprinoidei.

3. Рекомендовать использование УДПЖ-α как препарат неспецифического иммунокорректора для аквариумных рыб, при инфекционной патологии.

Кафедра микробиологии и иммунологии, Московской государственной академии ветеринарной медицины и биотехнологии им. К.И.Скрябина.
Геннадий Павлов, доктор биологических наук,
Профессор кафедры микробиологии и иммунологии,
Гунар Фолманис, доктор технических наук,
Годвин Агбеко Куджо Окпаттах, кандидат ветеринарных наук,
Михаил Шалаев
Сергей Потехин,студенты 3-курса ветеринарного факультета МГАВМиБ им. К.И.Скрябина